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光学显微镜可以观察到细胞膜吗?
来源: | 发布日期:2022-05-23 20:19:35
 

是的。宽场光学显微镜的分辨率很限为0.24um,能达到细胞分辨器(含细胞膜)的水平。

可通过以下三种光学方法观察到(相关光学配件需在光学显微镜上购买):

1、 相差法:

如下图所示,单细胞的形态,其中围绕边缘薄薄一圈的是细胞膜结构。

通过巧妙地将光的相位差转化为振幅差,使细胞厚度不同的部位产生明暗对比,使我们不需要染色活细胞的形态结构。

徕卡光学显微镜图片DMi8采用相差法拍摄。

2、 微分干涉法(DIC):

如下图所示,同一个单细胞的形,其中细胞膜结构是围绕细胞边缘微微凸起的薄圈。

微分干涉观察法识别和过滤同一方向的偏振光,使不同厚度的细胞呈现凹凸的轻微光3D三维效果。我们可以在透明的活细胞上看到细胞的形状,没有染色。

徕卡光学显微镜图片DMi8采用微分干涉法拍摄。

3、 荧光法:

如果初学者通过形态来区分细胞膜,更确定的区分方法是特定标记的荧光法。

荧光是一种特殊的标记染色方法,可标记的底物包括蛋白质,DNA,脂类,离子(如Ca2 )等等。不同的荧光染料对应于不同的标记基底和荧光波长(颜色)。活细胞也可以标记。目前市场上有多种探针染料或免疫荧光抗体染料,如细胞膜、细胞核、线粒体、溶酶体等。通过在荧光显微镜下观察相应染料的发光颜色,可以了解相应基底的定性、定位甚至定量关系。

如下图所示,同一个单细胞成像,绿色部分(边缘一圈)用鬼笔环肽标记Actin肌动蛋白属于细胞骨架。

徕卡光学显微镜图片DMi8采用荧光法三通道拍摄。

如下图所示,细胞成像、红色染料(边缘一圈)标有细胞膜,蓝色染料标有细胞核,绿色染料标有细胞浆中的某些蛋白质。

徕卡光学显微镜图片DM6B采用荧光法三通道拍摄。

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