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光学系统包括照明系统和成像系统。前者由光源、聚光镜和彩虹光圈组成。后者由接物镜和接物镜组成。
1.钨丝灯泡,光源内镜,为显微提供光线。
2.聚光镜由两个三透镜组成。其功能是收集来自光源的光,增强光使整个物体包含的视野均匀受光,提高物体的识别能力。聚光器可以降低,并附着在光圈上,以调节进入物体的光线。因此,在使用高倍镜时,要配备聚光器。
3.彩色光圈(可变光阑)由多个金属片组成。
4.物镜由数组透镜组成。直径越小,放大倍数越高。每个显微镜都有几个不同倍数的物镜,放大10倍(10×)、4倍(4×)叫低倍镜;放大40倍;(40×)叫高倍镜;放大100(100×)超过两倍的是油镜。物镜是显微镜获取物体图像的主要组成部分,其作用是收集任何点的光比,并利用入射光对观察到的物体进行**个放大图像。
表示物镜主要性能的参数通常标在每个物镜上。例如,10倍物镜标有10/0.25和160/0.17,10物镜放大倍数(即物镜放大倍数)10×),0.25为数值孔径(N.A),160为镜筒长度(160mm),0.17所需的盖玻片厚度。物镜分辨率取决于物镜的数值孔径(numerial aperture,N.A.)
N·A=n·sin(α/2)
式中,n=介质折射率。α/2=*大入射角的半数,即镜孔角的半数。
因此,光投射到物镜的角度越大,显微镜的效率就越大,这取决于物镜的直径和焦距。
显微镜的分辨率是指显微镜能够区分两点之间*小距离的能力。它与接物镜的数值孔径成正比,与光波长度成反比。因此,接物镜的数值孔径越大,光波长度越短,显微镜的分辨率越大,被检物体的细微结构也越不同。高分辨率意味着小分辨率距离,两者成反比。
肉眼能感觉到的光波平均长度是0.55μm,假使用数值孔径为0.65两点之间的*小距离是物镜(高倍镜)0.42μm,而在0.42μm以下两点之间的距离无法区分。即使使用倍数较高的目镜,显微镜的总放大率也无法区分。只有使用数值孔径较大的物镜来增加其分辨率。因此,显微镜的放大倍数不同于其分辨率。
油镜焦距短,镜孔角小,因此N·A光波越高,光波越短,可分辨的物体越小。此外,当滴沥青作为介质时,物镜和载玻片之间只有一层油性物质(其他物镜和载玻片之间有一层空气)。因为沥青的折射率等于1.52,与玻璃相同,当光线通过玻璃时,它可以直接通过沥青进入物镜而不折射,这可以使视觉光线充足。相反,当玻璃和物镜之间的介质是空气时,当光线通过玻璃时,折射散射,进入物镜的光线明显减少,从而降低视觉照明,影响分辨率。
5.眼镜上有一个金属圆筒,下端有一个较小的透镜和一个较大的透镜。它的功能是重新放大物镜放大和识别的物体。每个显微镜都有几个不同倍数的目镜,上面刻着5×”“10×”“12.5×等放大倍数,显微镜的放大倍数是目镜和物镜的放大倍数的乘积。
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