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如何选择一台适合自己的显微镜——光学部件物镜的选择(下)
来源: | 发布日期:2022-06-19 18:19:10
                                                 

伙计们,我又来了~

   

本期给大家带来显微镜物镜的知识。

   

地球上的每个人都知道什么是物镜。~

   

物镜是显微镜的灵魂,物镜是影响清晰度的*重要部分。

   

   

选择物镜时需要考虑以下问题:

   

1、放大倍数需要多大?

   

● 物镜可根据其放大率分为三类。包括:低倍物镜(2x、4x/5x和10x),中倍物镜(20x、40x)和高倍物镜(60x/63x、100x)。除了物镜的放大率不同外,物镜的介质也不同。例如,对于高倍镜头(60x和100x),通常使用浸油来获得高分辨率。空气被用作放大率较低的镜头的介质。

   

2、选择哪种观察方法?

   

● 显微物镜的类型很多,应用场景也不一样。根据观察方法的不同,有不同的类型。物镜的观察方法通常标记在物镜的外壳上。

   

● BF:明场;DF:暗场;PH:相差;PO:偏光;DIC:微分干涉;FL:荧光观察(蓝、绿、紫等);UVFL:紫外荧光观察。

   

3、如何选择成像效果好的物镜?

   

● ①选择具有平场矫正功能的物镜,即标有平场矫正功能的物镜Plan。②成像效果主要根据色差校正能力来判断:消色差物镜(Achro ** tic):红蓝光的色差只能校正。半复消色差物镜(FL):红、绿、蓝三色光的色差可以校正。全复消色差物镜(Apo):红、绿、蓝三色光的色差可以校正两次,红、蓝两色光的球差可以校正。

   

● 透明切片可选择平场消色差物镜(Ach)。荧光可以选择半复消色差物镜(FL),而且工作距离长,可以看玻片或者培养皿。如果需要更好的成像效果,可以选择全复消色差物镜(Apo),但Apo物镜工作距离不长,只适用于玻片,不适用于培养皿或培养瓶等厚样品。

   

   

4、分辨率的要求是什么?

   

● 显微镜的分辨率是两点之间的*小距离,分辨率越小,分辨率越高。(NA与分辨率成正比,NA = n * sin α。与放大率成正比,与景深成反比。在相同的放大倍数下,NA值越高越好。满足工作距离时选择NA物镜值高。

   

   

5、工作距离需要多长?(WD)

   

● 可分为:①物镜:工作距离小,可观察切片,但不能观察培养皿。②长工作距离物镜:用于倒置显微镜,可满足组织、悬浮液等材料的镜检。

   

   

6、玻片或培养板的厚度是多少?

   

● 标记物镜光学类型的背面(∞/0)(210/0),也就是说,斜杠后面的数字代表了玻璃的厚度,(∞/0.17)(210/0.17),玻片厚度适用0.17毫米。如果使用不合适的盖玻片,则会出现明显的球差(不同角度的光不会聚集在同一高度),从而降低成像的对比度和分辨率。NA物镜值越高,对盖玻片的厚度越敏感,所以要选择正规的盖玻片。NA值的物镜和长工作距离的物镜可以用可调盖玻片厚度调节环矫正不同厚度的玻璃,可以用来观察培养皿。观察时,可以调整到相应的培养皿厚度,或者使用共聚焦培养皿,中间厚度也是0.17。

   

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