（1）取镜和放置：光学显微镜平时存放在柜或箱中，用时从柜中取出，右手紧握镜臂，左一手托住镜座,将光学显微镜放在自己左肩前方的实验台上，镜座后端距桌边7厘米为宜，便于操作。

（2）对光：用拇指和中指移动旋转器（切忌手持物镜移动），使低倍镜对准镜台的通光孔（当转动听到碰叩声时，说明物镜光轴已对准镜筒中心）。调节为较大光圈并将反光镜转向光源，左眼在目镜上观察（右眼睁开）,同时调节反光镜偏转角度，直到视野内出现明亮光斑为止。

（3）放置玻片标本：取一玻片标本放在镜台上，一定使有盖玻片的一面朝上，切不可放反，用压片夹夹住，然后移动玻片，将所要观察的部位调到视野范围内。

（4）调节焦距：以左手按逆时针方向转动粗准焦螺旋，使镜筒缓慢地下降至物镜距标本片约5毫米处，应注意在下降镜筒时，切勿在目镜上观察。一定要从右侧看着镜筒下降，以免下降过多，造成镜头或标本片的损坏。然后，两眼同时睁开，用左眼在目镜上观察，左手顺时针方向缓慢转动粗准焦螺旋，使镜筒缓慢下降，直到视野中出现清晰的物像为止。

如果物像不在视野中心，可移动玻片，将所要观察的部位调到视野范围内。（注意移动玻片的方向与视野物像移动的方向是相反的）。如果视野内的亮度不合适，可通过调整光圈的大小来调节，如果在调节焦距时，镜台下降已超过工作距离而未见到物像，说明此次操作失败，则应重新操作，切不可盲目地上升镜台。