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荧光显微镜用于研究化学物质在细胞中的吸收、运输、分布和定位。被测物体产生荧光的方式有两种:自发荧光,紫外线照射后直接发出荧光称为二次荧光,被观察物经荧光染料处理后,经紫外光照射后才能发出荧光。细胞中的一些物质,如叶绿素,受到紫外线照射后会产生自发荧光。其他物质虽然本身没有荧光,但用荧光染料或荧光抗体染色后,可以发出二次荧光
荧光显微镜采用发光效率高的点光源,发射一定波长的光作为激发光,激发标本中的荧光物质发出各种颜色的荧光,然后通过物镜和目镜的放大进行观察。在这样强的对比背景下,即使荧光微弱,也容易识别,灵敏度高,主要用于研究细胞结构功能和化学成分。
荧光显微镜可分为两种类型:透射显微镜和下落显微镜。前者是原始的,后者是**的。两种荧光显微镜的基本构造相似,主要区别如下:透射激发光通过标本,使整个标本产生荧光,然后进入物镜,放大倍数越高,荧光越弱;入射的激发光投射到样品表面,样品表面产生荧光,然后荧光进入物镜。放大倍数越高,荧光越强,适合高倍观察。
荧光显微镜的主要部件有汞灯光源、激发滤板、分色镜(脱落式)、压制滤板、暗场聚光器(透射式)等。此外,由于汞灯发热严重,大部分都装有吸热过滤器。
此外,上述所有的荧光显微镜都可以通过安装CCD组装成数字显微镜,将显微镜看到的物理图像转换成数模图像,并使其在计算机上成像。因此,我们可以从传统的普通双目观察到显示器上面观察来研究微观领域,从而大大提高工作效率。
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